मलेरिया पीएफ/पीवी एंटीजन रैपिड टेस्ट किट (कोलाइडल गोल्ड)

मलेरिया एक मच्छर जनित, हेमोलिटिक, ज्वर संबंधी बीमारी है जो 200 मिलियन से अधिक लोगों को संक्रमित करती है और प्रति वर्ष 1 मिलियन से अधिक लोगों की जान ले लेती है।यह प्लाज्मोडियम की चार प्रजातियों के कारण होता है: पी. फाल्सीपेरम, पी. विवैक्स, पी. ओवले, और पी. मलेरिया।ये प्लास्मोडिया मानव एरिथ्रोसाइट्स को संक्रमित और नष्ट कर देते हैं, जिससे ठंड लगना, बुखार, एनीमिया और स्प्लेनोमेगाली पैदा होती है।पी. फाल्सीपेरम अन्य प्लास्मोडियल प्रजातियों की तुलना में अधिक गंभीर बीमारी का कारण बनता है और अधिकांश मलेरिया से होने वाली मौतों का कारण बनता है।पी. फाल्सीपेरम और पी. विवैक्स सबसे आम रोगजनक हैं, हालांकि, प्रजातियों के वितरण में काफी भौगोलिक भिन्नता है।

परंपरागत रूप से, मलेरिया का निदान परिधीय रक्त के गिम्सा सने हुए मोटे धब्बों पर जीवों के प्रदर्शन से किया जाता है, और प्लास्मोडियम की विभिन्न प्रजातियों को संक्रमित एरिथ्रोसाइट्स में उनकी उपस्थिति से पहचाना जाता है।यह तकनीक सटीक और विश्वसनीय निदान करने में सक्षम है, लेकिन केवल तभी जब इसे परिभाषित प्रोटोकॉल का उपयोग करके कुशल सूक्ष्मदर्शी द्वारा किया जाता है, जो दुनिया के दूरदराज और गरीब क्षेत्रों के लिए बड़ी बाधाएं प्रस्तुत करता है।

इन बाधाओं को हल करने के लिए मलेरिया पीएफ/पीवी एजी रैपिड टेस्ट विकसित किया गया है।यह पी. फाल्सीपेरम और पी. विवैक्स के साथ संक्रमण का एक साथ पता लगाने और अंतर करने के लिए पी. फाल्सीपेरम हिस्टिडीन रिच प्रोटीन-II (पीएचआरपी-II) और पी. विवैक्स लैक्टेट डीहाइड्रोजनेज (पीवी-एलडीएच) के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी का उपयोग करता है।परीक्षण प्रयोगशाला उपकरण के बिना, अप्रशिक्षित या न्यूनतम कुशल कर्मियों द्वारा किया जा सकता है

मलेरिया पीएफ/पीवी एजी रैपिड टेस्ट एक पार्श्व प्रवाह क्रोमैटोग्राफिक इम्यूनोपरख है।स्ट्रिप परीक्षण घटकों में शामिल हैं: 1) एक बरगंडी रंग का संयुग्म पैड जिसमें कोलाइड गोल्ड (पीवी-एलडीएच-गोल्ड कंजुगेट्स) के साथ संयुग्मित माउस एंटी-पीवी-एलडीएच एंटीबॉडी और कोलाइड गोल्ड (पीएचआरपी-II-गोल्ड कंजुगेट्स) के साथ संयुग्मित माउस एंटी-पीएचआरपी-II एंटीबॉडी होता है, 2) एक नाइट्रोसेल्यूलोज झिल्ली पट्टी जिसमें दो परीक्षण बैंड (पीवी और पीएफ बैंड) और एक नियंत्रण बैंड (सी बैंड) होता है।Pv बैंड को Pv संक्रमण का पता लगाने के लिए एक अन्य माउस एंटी-Pv-LDH विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ पूर्व-लेपित किया जाता है, Pf बैंड को Pf संक्रमण का पता लगाने के लिए पॉलीक्लोनल एंटी-pHRP-II एंटीबॉडी के साथ पहले से लेपित किया जाता है, और C बैंड को बकरी विरोधी माउस IgG के साथ लेपित किया जाता है।

परख के दौरान, रक्त के नमूने की पर्याप्त मात्रा को परीक्षण कैसेट के नमूना कुएं (एस) में भेज दिया जाता है, बफर कुएं (बी) में एक लिसीस बफर जोड़ा जाता है।बफर में एक डिटर्जेंट होता है जो लाल रक्त कोशिकाओं को नष्ट करता है और विभिन्न एंटीजन छोड़ता है, जो केशिका क्रिया द्वारा कैसेट में रखी पट्टी पर स्थानांतरित हो जाते हैं।यदि नमूने में Pv-LDH मौजूद है तो यह Pv-LDH-सोने के संयुग्मों से बंध जाएगा।इसके बाद इम्युनोकॉम्पलेक्स को प्री-कोटेड एंटी-पीवी-एलडीएच एंटीबॉडी द्वारा झिल्ली पर कैद कर लिया जाता है, जिससे बरगंडी रंग का पीवी बैंड बनता है, जो पीवी पॉजिटिव परीक्षण परिणाम का संकेत देता है।वैकल्पिक रूप से, pHRP-II यदि नमूने में मौजूद है तो pHRP-II-स्वर्ण संयुग्मों से बंध जाएगा।फिर इम्युनोकॉम्पलेक्स को पूर्व-लेपित एंटी-पीएचआरपी-II एंटीबॉडी द्वारा झिल्ली पर कब्जा कर लिया जाता है, जिससे बरगंडी रंग का पीएफ बैंड बनता है, जो पीएफ सकारात्मक परीक्षण परिणाम का संकेत देता है।किसी भी परीक्षण बैंड की अनुपस्थिति नकारात्मक परिणाम का संकेत देती है।परीक्षण में एक आंतरिक नियंत्रण (सी बैंड) होता है, जिसे किसी भी परीक्षण बैंड पर रंग विकास की परवाह किए बिना बकरी एंटी-माउस आईजीजी / माउस आईजीजी (एंटी-पीवी-एलडीएच और एंटी-पीएचआरपीआईआई) -गोल्ड संयुग्मों के इम्यूनोकॉम्प्लेक्स के बरगंडी रंग के बैंड को प्रदर्शित करना चाहिए।अन्यथा, परीक्षण का परिणाम अमान्य है और नमूने का किसी अन्य उपकरण से दोबारा परीक्षण किया जाना चाहिए।