परीक्षण का सारांश और स्पष्टीकरण
मलेरिया एक मच्छर जनित, हेमोलिटिक, ज्वर संबंधी बीमारी है जो 200 मिलियन से अधिक लोगों को संक्रमित करती है और प्रति वर्ष 1 मिलियन से अधिक लोगों की जान ले लेती है।यह प्लाज्मोडियम की चार प्रजातियों के कारण होता है: पी. फाल्सीपेरम, पी. विवैक्स, पी. ओवले, और पी. मलेरिया।ये प्लास्मोडिया मानव एरिथ्रोसाइट्स को संक्रमित और नष्ट कर देते हैं, जिससे ठंड लगना, बुखार, एनीमिया और स्प्लेनोमेगाली पैदा होती है।पी. फाल्सीपेरम अन्य प्लास्मोडियल प्रजातियों की तुलना में अधिक गंभीर बीमारी का कारण बनता है और अधिकांश मलेरिया से होने वाली मौतों का कारण बनता है, और यह दो सबसे आम मलेरिया रोगजनकों में से एक है।
परंपरागत रूप से, मलेरिया का निदान परिधीय रक्त के गिम्सा सने हुए मोटे धब्बों पर जीवों के प्रदर्शन से किया जाता है, और प्लास्मोडियम की विभिन्न प्रजातियों को संक्रमित एरिथ्रोसाइट्स में उनकी उपस्थिति से पहचाना जाता है।यह तकनीक सटीक और विश्वसनीय निदान करने में सक्षम है, लेकिन केवल तभी जब इसे परिभाषित प्रोटोकॉल का उपयोग करके कुशल सूक्ष्मदर्शी द्वारा किया जाता है, जो दुनिया के दूरदराज और गरीब क्षेत्रों के लिए बड़ी बाधाएं प्रस्तुत करता है।
इन बाधाओं को हल करने के लिए पीएफ एजी रैपिड टेस्ट विकसित किया गया है।यह मानव रक्त नमूने में पीएफ विशिष्ट एंटीजन pHRP-II का पता लगाता है।इसे प्रयोगशाला उपकरणों के बिना, अप्रशिक्षित या न्यूनतम कुशल कर्मियों द्वारा किया जा सकता है।
सिद्धांत
पीएफ एजी रैपिड टेस्ट एक पार्श्व प्रवाह क्रोमैटोग्राफिक इम्यूनोपरख है।परीक्षण पट्टी के घटकों में शामिल हैं: 1) एक बरगंडी रंग का संयुग्म पैड जिसमें मोनोक्लोनल एंटी-पीएचआरपी-II एंटीबॉडी होता है जो कोलाइड गोल्ड (पीएचआरपी II-सोना संयुग्मित) के साथ संयुग्मित होता है, 2) एक नाइट्रोसेल्यूलोज झिल्ली पट्टी जिसमें एक परीक्षण बैंड (पीएफ) और एक नियंत्रण बैंड (सी बैंड) होता है।पीएफ बैंड पॉलीक्लोनल एंटी-पीएचआरपी-II एंटीबॉडी के साथ पूर्व-लेपित है, और सी बैंड बकरी एंटी-माउस आईजीजी के साथ पूर्व-लेपित है।
परख के दौरान, रक्त के नमूने की पर्याप्त मात्रा को परीक्षण कैसेट के नमूना कुएं (एस) में भेज दिया जाता है, बफर कुएं (बी) में एक लिसीस बफर जोड़ा जाता है।बफर में एक डिटर्जेंट होता है जो लाल रक्त कोशिकाओं को नष्ट करता है और pHRPII एंटीजन को छोड़ता है, जो कैसेट में रखी पट्टी के पार केशिका क्रिया द्वारा स्थानांतरित होता है।यदि नमूने में pHRP-II मौजूद है तो वह pHRP II-सोने के संयुग्मों से बंध जाएगा।इसके बाद इम्युनोकॉम्पलेक्स को पूर्व-लेपित पॉलीक्लोनल एंटीपीएचआरपी II एंटीबॉडी द्वारा झिल्ली पर कब्जा कर लिया जाता है, जिससे बरगंडी रंग का पीएफ बैंड बनता है, जो पीएफ सकारात्मक परीक्षण परिणाम का संकेत देता है।
पीएफ बैंड की अनुपस्थिति एक नकारात्मक परिणाम का सुझाव देती है।परीक्षण में एक आंतरिक नियंत्रण (सी बैंड) होता है, जिसे किसी भी पीएफ बैंड पर रंग विकास की परवाह किए बिना बकरी विरोधी माउस आईजीजी / माउस आईजीजी (पीएचआरपी II-गोल्ड संयुग्म) के इम्यूनोकॉम्प्लेक्स का बरगंडी रंग का बैंड प्रदर्शित करना चाहिए।अन्यथा, परीक्षण का परिणाम अमान्य है और नमूने का किसी अन्य उपकरण से दोबारा परीक्षण किया जाना चाहिए।