विस्तृत विवरण
वेस्टर्न ब्लॉट (WB), स्ट्रिप इम्यूनोएसे (LIATEK HIV Ⅲ), रेडियोइम्यूनोप्रेसिपिटेशन एसे (RIPA) और इम्यूनोफ्लोरेसेंस एसे (IFA)।चीन में आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली सत्यापन परीक्षण विधि डब्ल्यूबी है।
(1) वेस्टर्न ब्लॉट (डब्ल्यूबी) एक प्रायोगिक विधि है जिसका व्यापक रूप से कई संक्रामक रोगों के निदान में उपयोग किया जाता है।जहां तक एचआईवी के एटियलॉजिकल निदान का सवाल है, यह एचआईवी एंटीबॉडी की पुष्टि करने के लिए इस्तेमाल की जाने वाली पहली पुष्टि प्रयोगात्मक विधि है।अन्य परीक्षण विधियों के फायदे और नुकसान की पहचान करने के लिए डब्ल्यूबी के पता लगाने के परिणामों को अक्सर "स्वर्ण मानक" के रूप में उपयोग किया जाता है।
पुष्टिकरण परीक्षण प्रक्रिया:
एचआईवी-1/2 मिश्रित प्रकार और एकल एचआईवी-1 या एचआईवी-2 प्रकार हैं।सबसे पहले, परीक्षण के लिए HIV-1/2 मिश्रित अभिकर्मक का उपयोग करें।यदि प्रतिक्रिया नकारात्मक है, तो रिपोर्ट करें कि एचआईवी एंटीबॉडी नकारात्मक है;यदि यह सकारात्मक है, तो यह रिपोर्ट करेगा कि यह एचआईवी-1 एंटीबॉडी पॉजिटिव है;यदि सकारात्मक मानदंड पूरे नहीं होते हैं, तो यह माना जाता है कि एचआईवी एंटीबॉडी परीक्षण का परिणाम अनिश्चित है।यदि एचआईवी-2 का एक विशिष्ट संकेतक बैंड है, तो आपको एचआईवी 2 एंटीबॉडी पुष्टिकरण परीक्षण फिर से करने के लिए एचआईवी-2 इम्युनोब्लॉटिंग अभिकर्मक का उपयोग करने की आवश्यकता है, जो एक नकारात्मक प्रतिक्रिया दिखाता है, और रिपोर्ट करता है कि एचआईवी 2 एंटीबॉडी नकारात्मक है;यदि यह सकारात्मक है, तो यह रिपोर्ट करेगा कि यह एचआईवी -2 एंटीबॉडी के लिए सीरोलॉजिकल रूप से सकारात्मक है, और नमूना को न्यूक्लिक एसिड अनुक्रम विश्लेषण के लिए राष्ट्रीय संदर्भ प्रयोगशाला में भेज देगा।
डब्ल्यूबी की संवेदनशीलता आम तौर पर प्रारंभिक स्क्रीनिंग परीक्षण से कम नहीं होती है, लेकिन इसकी विशिष्टता बहुत अधिक होती है।यह मुख्य रूप से विभिन्न एचआईवी एंटीजन घटकों के पृथक्करण, एकाग्रता और शुद्धिकरण पर आधारित है, जो विभिन्न एंटीजन घटकों के खिलाफ एंटीबॉडी का पता लगा सकता है, इसलिए प्रारंभिक स्क्रीनिंग परीक्षण की सटीकता की पहचान करने के लिए डब्ल्यूबी विधि का उपयोग किया जा सकता है।डब्ल्यूबी पुष्टिकरण परीक्षण परिणामों से यह देखा जा सकता है कि यद्यपि अच्छी गुणवत्ता वाले अभिकर्मकों को प्रारंभिक स्क्रीनिंग परीक्षण के लिए चुना जाता है, जैसे कि तीसरी पीढ़ी एलिसा, फिर भी गलत सकारात्मक परिणाम होंगे, और सटीक परिणाम केवल पुष्टिकरण परीक्षण के माध्यम से प्राप्त किए जा सकते हैं।
(2) इम्यूनोफ्लोरेसेंस परख (आईएफए)
IFA विधि किफायती, सरल और तेज़ है, और WB अनिश्चित नमूनों के निदान के लिए FDA द्वारा इसकी अनुशंसा की गई है।हालाँकि, महंगे फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप की आवश्यकता होती है, अच्छी तरह से प्रशिक्षित तकनीशियनों की आवश्यकता होती है, और अवलोकन और व्याख्या के परिणाम व्यक्तिपरक कारकों से आसानी से प्रभावित होते हैं।परिणामों को लंबे समय तक संरक्षित नहीं किया जाना चाहिए, और आईएफए को सामान्य प्रयोगशालाओं में नहीं किया जाना चाहिए और लागू नहीं किया जाना चाहिए।
एचआईवी एंटीबॉडी पुष्टिकरण परीक्षण परिणाम रिपोर्ट
एचआईवी एंटीबॉडी पुष्टिकरण परीक्षण के परिणाम संलग्न तालिका 3 में सूचित किए जाएंगे।
(1) एचआईवी 1 एंटीबॉडी पॉजिटिव निर्णय मानदंड का अनुपालन करें, "एचआईवी 1 एंटीबॉडी पॉजिटिव (+)" रिपोर्ट करें, और आवश्यकतानुसार परीक्षण के बाद परामर्श, गोपनीयता और महामारी स्थिति रिपोर्ट का अच्छा काम करें।एचआईवी 2 एंटीबॉडी पॉजिटिव निर्णय मानदंड का अनुपालन करें, "एचआईवी 2 एंटीबॉडी पॉजिटिव (+)" रिपोर्ट करें, और आवश्यकतानुसार परीक्षण के बाद परामर्श, गोपनीयता और महामारी स्थिति रिपोर्ट का अच्छा काम करें।
(2) एचआईवी एंटीबॉडी नकारात्मक निर्णय मानदंड के अनुरूप, और "एचआईवी एंटीबॉडी नकारात्मक (-)" रिपोर्ट करें।संदिग्ध "विंडो पीरियड" संक्रमण के मामले में, जल्द से जल्द स्पष्ट निदान करने के लिए आगे एचआईवी न्यूक्लिक एसिड परीक्षण की सिफारिश की जाती है।
(3) एचआईवी एंटीबॉडी अनिश्चितता के मानदंडों के अनुरूप, "एचआईवी एंटीबॉडी अनिश्चितता (±)" की रिपोर्ट करें, और टिप्पणी में नोट करें कि "4 सप्ताह के बाद पुन: परीक्षण की प्रतीक्षा करें"।